ГОСТ 28504-90
Завантажити документ
Формат .docx · доступно зареєстрованим користувачам
Группа М29
Методы определения структурной поврежденности
и бактериальной зараженности кожевой ткани
Undressed fur skins and woolskins.
Methods for determination of structure damage and bacterial infection of flesh side
Срок действия с 01.01.92
до 01.01.97*
________________________________
* Ограничение срока действия снято
по протоколу N 7-95 Межгосударственного Совета
по стандартизации, метрологии и сертификации
(ИУС N 11, 1995 год).
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Государственным комитетом легкой промышленности при Госплане СССР
А.Н.Беседин, д-р техн. наук; М.А.Васильева, канд. техн. наук; Л.П.Плюснина, канд. техн. наук; И.Н.Коробейникова, канд. техн. наук; Э.И.Степанова; Т.В.Казакевич; Л.А.Рычкова
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 30.03.90 N 731
3. Срок первой проверки - 1994 г. Периодичность проверки - 5 лет
Обозначение НТД, на который дана ссылка
Номер пункта
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
ТУ 3-3.154-80
2.1
ТУ 6-09-4185-76
2.1
ТУ 6-14-937-78
2.1
ТУ 64-1-2950-77
2.1
ТУ 81-05-80-75
2.1
ТУ 16-681.032-84
2.1
Настоящий стандарт распространяется на невыделанные меховые шкурки и шубную овчину и устанавливает методы определения структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины всех способов консервирования с помощью исследований под микроскопом окрашенных гистологических срезов кожевой ткани и качественных реакций на водной вытяжке кожевой ткани.
Применение методов предусматривается на стадии научно-исследовательских и предварительных испытаний. Применение метода качественных реакций на водной вытяжке из кожевой ткани применяется при разногласиях в оценке качества сырья, поступившего на предприятия меховой промышленности.
1.1. Для определения структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани от производственной партии отбирают не менее 10 шкурок методом систематического отбора: первую шкурку отбирают произвольно, а последующие - через одинаковое число шкурок, равное частному от деления объема партии на объем выборки.
1.2. Из каждой отобранной шкурки в огузочной части или у основания задней лапки вырезают образцы размером 20х10 мм.
Для приготовления водной вытяжки кожевой ткани допускается отбор образцов в виде полосок, вырезанных по периметру шкурки.
1.3. При наличии на поверхности отобранных шкурок признаков поражения ее микроорганизмами образцы для анализов отбирают с пораженного и непораженного участков.
Для проведения анализов должны применяться:
микротом замораживающий МЗ-2 по ТУ 64-1-2950;
микроскоп световой биологический Биолам Р по ТУ 3-3.154;
электрошкаф сушильный лабораторный по ТУ 16-681.032;
весы лабораторные по ГОСТ 24104;
термометр лабораторный;
стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284;
стекла покровные для микропрепаратов по ГОСТ 6672;
бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026;
по ГОСТ 25336;
шпатель по ГОСТ 10778;
игла гистологическая препаровальная прямая;
пробки резиновые по ГОСТ 7852;
вата по ГОСТ 5556;
воронки стеклянные по ГОСТ 25336;
пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;
по ГОСТ 20292;
ступка и пестик фарфоровые по ГОСТ 9147;
по ГОСТ 1770;
формалин технический по ГОСТ 1625, раствор с массовой долей 4%;
соль поваренная пищевая по ГОСТ 13830;
эозин по ТУ 6-09-4185, водный раствор с массовой долей 0,1%
спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300, раствор с объемной долей 96% и 70%;
метиленовый голубой по ТУ 6-14-937, водный и спиртовой раствор с массовой долей 1%;
бура по ГОСТ 8429;
кислота уксусная по ГОСТ 61;
ацетон по ГОСТ 2603;
ксилол по ГОСТ 9949;
толуол по ГОСТ 5789;
вода дистиллированная по ГОСТ 6709;
бальзам кедровый сибирский по ТУ 81-05-80;
крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор с массовой долей 0,5%;
калий йодистый по ГОСТ 4232;
йод по ГОСТ 4159.
3.1. С образцов, отобранных по п.1.2, состригают волосяной покров.
3.2. Подготовка к проведению микроскопического анализа
раствора формалина.
дистиллированной воды.
дистиллированной воды при температуре (20±2) °С.
этилового спирта с объемной долей 70% при температуре (20±2) °С.
дистиллированной воды, подогретой до (80±2) °С, после чего добавляют 1 г метиленового голубого. Раствор выдерживают в помещении не менее месяца после приготовления при температуре не ниже (20±2) °С.
дистиллированной воды.
3.2.7. Обезвоживающие срезы растворы, состоящие из ацетона, ксилола или толуола, готовят в следующих соотношениях:
раствор N 3 - к 95 частям ацетона добавляют 5 частей ксилола или толуола;
раствор N 4 - к 70 частям ацетона добавляют 30 частей ксилола или толуола;
раствор N 5 - к 30 частям ацетона добавляют 70 частей ксилола или толуола.
3.2.8. Раствор кедрового сибирского бальзама готовят следующим образом: для получения густого раствора консистенции сиропа куски сухой смолы заливают растворителем (ксилолом или толуолом) с таким расчетом, чтобы он покрывал смолу. После растворения смолы выбирают раствор желательной консистенции или дают немного испариться растворителю, или добавляют еще сухой смолы. Растворение ускоряется при проведении процесса в сушильном электрошкафу при температуре 50-60 ° C.
на 10 образцов.
на 5 образцов.
3.2.11. После фиксации образцы кожевой ткани промывают в проточной воде не менее 1 ч.
3.2.12. Приготовление срезов с плоскостью сечения по ходу корней волос проводят на замораживающем микротоме. Толщина среза должна быть не более 40-60 мк. Срезы помещают в чашечки с дистиллированной водой.
3.2.13. Полученные срезы окрашивают в смеси красителей, приготовленной по п.3.2.6, при температуре (20±2) °С в течение 5-10 мин.
дистиллированной воды) и дважды промывают в дистиллированной воде в течение 1-2 мин.
3.2.14. Окрашивание срезов в водном растворе эозина с массовой долей 0,1% проводят в течение 2-3 мин с последующим промыванием в дистиллированной воде в течение 1-2 мин.
3.2.15. Обезвоживание срезов проводят в растворах, приготовленных по п.3.2.7, последовательно перенося срезы через растворы N 3, 4 и 5.
Перенос срезов в указанные растворы и в последующий раствор чистого ксилола или толуола проводят на шпателе так, чтобы срез был полностью расправлен.
Перед погружением в раствор N 3 со среза осторожно удаляют излишек воды фильтровальной бумагой. После погружения срез сразу же вынимают и переносят в раствор N 4, где его оставляют на 5-6 мин, затем срез переносят в раствор N 5 на 10-15 мин. При загрязнении растворы заменяют новыми.
3.2.16. Просветление срезов проводят в чистом ксилоле или толуоле в течение 8-10 мин.
3.2.17. Окрашенные и обезвоженные срезы осторожно переносят с помощью шпателя и препаровальной иглы на предметное стекло, на поверхность среза наносят каплю кедрового бальзама и помещают под покровное стекло.
3.3. Подготовка к проведению анализа с помощью качественных реакций на водной вытяжке кожевой ткани.
3.3.1. От каждого образца, отобранного по п.1.2, берут навеску массой 1 г, взвешенную с погрешностью не более 0,1 г.
.
кипяченой дистиллированной воды, охлажденной до температуры (20±2) °С, закрывают пробкой, хорошо взбалтывают и оставляют в покое на 1 ч. Затем содержимое колбы взбалтывают и фильтруют через вату в сухую колбу.
дистиллированной воды при температуре (20±2) °С.
кипящей воды. Раствор кипятят 2-3 мин.
.
4.1. Проведение микроскопического анализа.
4.1.1. Приготовленные по п.3.2.17 препараты помещают на предметный столик микроскопа.
).
4.1.2. За критерий оценки структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины приняты показатели: сохранность структурных компонентов кожевой ткани; способность к избирательному окрашиванию отдельных структур с выявлением клеточного строения; отсутствие или наличие бактерий в толще кожевой ткани.
Нарушение сохранности структурных компонентов кожевой ткани меховых шкурок и шубной овчины может быть вызвано воздействием на нее автолиза, бактерий, высоких температур, химических веществ, а в шкурках с интенсивно развитыми жировыми включениями - продуктов окисления жировых и тучных клеток, вызывающих образование жировой гари, а также пустот и щелей.
4.1.3. При окрашивании срезов метиленовым голубым с бурой и эозином ядра клеточных структур бактерии окрашиваются интенсивно в сине-фиолетовый цвет, но бактерии значительно уступают по своим размерам клеточным ядрам. Коллагеновые волокна сосочкового и сетчатого слоев окрашиваются в розовый цвет.
4.1.4. Для характеристики степени структурной поврежденности и бактериальной зараженности кожевой ткани меховых шкурок приняты четыре градации:
структурные повреждения и бактериальная зараженность отсутствуют;
слабая степень поврежденности и бактериальной зараженности;
средняя степень поврежденности и бактериальной зараженности;
сильная степень поврежденности и бактериальной зараженности.
4.1.4.1. Нормальными (структурные повреждения и бактериальная зараженность отсутствуют) считаются шкурки, у которых наблюдается полная сохранность микроструктуры с четким выявлением ядер клеток. Коллагеновые пучки с четкими контурами и равномерной окраской. Плотный контакт эпидермиса с дермой. Внутреннее корневое влагалище волосяного фолликула интенсивно окрашено в сине-фиолетовый цвет со слабым выявлением границ составляющих его веретенообразных клеток. Кожевая ткань не содержит бактерий или они имеются только