ГОСТ 10444.1-84
Цей стандарт визначає методи підготовки реактивів, барвників, індикаторів та поживних середовищ для мікробіологічного аналізу консервованих продуктів. Він встановлює вимоги до якості води, лабораторного посуду, умов стерилізації, корекції pH та режимів зберігання готових середовищ.
Спеціалісту з ОП слід перевірити наявність у лабораторії протоколів стерилізації автоклавів (вимоги до температури та часу) та організувати контроль за використанням засобів індивідуального захисту при роботі з хімічними реактивами та автоклавуванні.
Скачать документ
Формат .docx · доступно зарегистрированным пользователям
Группа Н09
Приготовление растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред,
применяемых в микробиологическом анализе
Canned food. Preparation of reagent solutions, dyes, indicators and culture media
for microbiological analysis
Дата введения 1985-07-01
ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 17.01.84
Ограничение срока действия снято по протоколу N 4-93 Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 4-94)
ИЗДАНИЕ с Изменением N 1, утвержденным в июле 1990 г. (ИУС 11-90)
Настоящий стандарт распространяется на методы приготовления растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
1.1. Для приготовления растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред (если нет специальных указаний) применяют:
воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;
реактивы квалификации х. ч. и ч. д. а. по ГОСТ 13867-68;
вспомогательные реактивы и растворы по ГОСТ 4517-87;
растворы индикаторов по ГОСТ 4919.1-77.
1.2. Растворы реактивов, красок, индикаторов приготовляют, используя стеклянную, лабораторную, мерную посуду, вымеренную для слива, класса А; для приготовления питательных сред (если нет специальных указаний) используют стеклянную лабораторную мерную посуду, вымеренную для слива, класса Б.
, промывают водопроводной, а затем дистиллированной водой и автоклавируют при температуре (121±1) °С в течение 1 ч.
1.4. Если в технологии приготовления питательных сред не указаны условия растворения питательных сред или компонентов, то их растворяют при перемешивании в воде комнатной температуры до полного растворения не менее 15 мин и затем, при необходимости, нагревают до растворения среды или ее компонентов.
, по каплям прибавляя при перемешивании раствор к питательной среде и определяя значение рН в периодически отбираемой пробе потенциометрически или с помощью индикатора. Значение рН питательных сред при стерилизации может изменяться. При подщелачивании среды щелочью рН после кипячения и стерилизации снижается примерно на 0,2, а при приготовлении сред с настоем печени - на 0,3-0,4. Поэтому при приготовлении сред устанавливают рН на 0,2-0,4 выше заданного, кипятят, пока рН не понизится на 0,2-0,3, снова проверяют рН, исправляют, при необходимости, и стерилизуют в автоклаве. Обязательно проверяют рН после стерилизации.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
1.6. Питательные среды, если нет специальных указаний, стерилизуют по ГОСТ 26668-85.
1.7. Готовые питательные среды хранят, если нет специальных указаний, при комнатной температуре не более 3 сут и при температуре около 4 °С не более одного месяца.
Для приготовления растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред применяются:
автоклав для стерилизации питательных сред;
стерилизатор паровой медицинский по ГОСТ 19569-89;
пластины асбестовые фильтрующие и стерилизующие по ГОСТ 480-78;
баня водяная с терморегулятором, позволяющая поддерживать температуру от 20 до 100 °С с отклонением до 1 °С от заданной;
весы лабораторные по ГОСТ 24104-88*;
____________
* С 01.07.2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001.
воронки для горячего фильтрования;
воронки стеклянные по ГОСТ 25336-82;
гомогенизатор или смеситель лабораторный;
горелка газовая или спиртовка по ГОСТ 25336-82;
дистиллятор электрический марки Д N 9;
капельницы;
кастрюли разные;
колбы плоскодонные конические или круглые разной вместимости по ГОСТ 25336-82;
кюветы разные для окрашивания препаратов;
марля медицинская по ГОСТ 9412-93;
мясорубка по ГОСТ 4025-95;
ножи;
ножницы;
палочки стеклянные по ГОСТ 25336-82;
пинцеты по ГОСТ 21241-89;
пипетки Мора;
пипетки разной вместимости;
плитка электрическая по ГОСТ 14919-83;
рН-метр;
пробирки разной вместимости по ГОСТ 25336-82;
промывалка;
рефрактометр;
ареометр по ГОСТ 18481-81;
сетки асбестовые;
стекла часовые;
ступки фарфоровые по ГОСТ 9147-80;
термометры химические от 0 до 50 °С и от 50 до 100 °С по ГОСТ 28498-90;
термостаты, позволяющие поддерживать температуру в пределах от 28 до 55 °С с отклонением до 0,5 °С от заданной;
фильтры Зейтца;
фильтры мембранные N 2;
;
холодильник по ГОСТ 16317-87;
(3000 об/мин);
цилиндры разной вместимости по ГОСТ 1770-74;
часы песочные ОСТ 25-11-38-84;
чашки Петри бактериологические по ГОСТ 25336-82;
шкаф сушильный;
шпатели металлические;
шпатели стеклянные;
шприцы по ГОСТ 22967-90.
Для приготовления растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред применяются:
агар микробиологический по ГОСТ 17206-96;
агар сухой питательный;
аммоний лимоннокислый;
аммоний щавелевокислый 1-водный по ГОСТ 5712-78;
ацетон по ГОСТ 2603-79;
бром по ГОСТ 4109-79;
бромкрезолпурпур;
бромтимоловый синий;
водорода пероксид по ГОСТ 10929-76;
бумага фильтровальная по ГОСТ 12026-76;
вата гигроскопическая медицинская по ГОСТ 5556-81;
вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72;
глицин;
глицерин по ГОСТ 6824-96;
глюкоза по ГОСТ 6038-79;
дрожжи хлебопекарные прессованные по ГОСТ 171-81;
желатин пищевой по ГОСТ 11293-89;
железоаммонийные квасцы;
железо (II) сернокислое 7-водное по ГОСТ 4148-78;
железо треххлористое 6-водное по ГОСТ 4147-74;
инфузорная земля;
йод по ГОСТ 4159-79;
калий азотнокислый по ГОСТ 4217-77;
калий двухромово-кислый по ГОСТ 4220-75;
калий сернокислый по ГОСТ 4145-74;
калий йодистый по ГОСТ 4232-74;
калий углекислый по ГОСТ 10690-73;
калия теллурит;
калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198-75 или двузамещенный 3-водный по ГОСТ 2493-75;
кальций углекислый по ГОСТ 4530-76;
капуста по ГОСТ 1724-85;
картофель по ГОСТ 7176-85;
кислота аскорбиновая;
кислота лимонная пищевая по ГОСТ 908-79;
кислота молочная пищевая по ГОСТ 490-79;
кислота серная по ГОСТ 4204-77;
кислота соляная по ГОСТ 3118-77;
кислота уксусная по ГОСТ 61-75;
крахмал растворимый по ГОСТ 10163-76;
кристаллический фиолетовый;
кровь кролика;
кровь крупного рогатого скота, лошади или барана;
лакмус или лакмоид;
лактоза;
литий хлористый 6-водный;
маннит;
масло вазелиновое медицинское по ГОСТ 3164-78;
медь (II) сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165-78;
молоко коровье пастеризованное по ГОСТ 13277-79;
мясо говядина по ГОСТ 779-55, мясо баранина по ГОСТ 1935-55;
мясо-телятина по ГОСТ 779-55;
мясо-конина по ГОСТ 27095-86;
мука кукурузная по ГОСТ 14176-69;
натрия гидроокись по ГОСТ 4328-77;
натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280-76;
натрия пируват;
натрий сернистокислый;
натрий углекислый по ГОСТ 83-79;
натрий фосфорнокислый двузамещенный по ГОСТ 11773-76 и однозамещенный 2-водный по ГОСТ 245-76;
натрий уксуснокислый 3-х водный по ГОСТ 199-78;
натрий хлористый по ГОСТ 4233-77;
натрия азид;
1-нафтол;
парадиметиламинобензальдегид;
парафин по ГОСТ 23683-89;
панкреатин (порошок, в 1 г - 25 ед.);
поджелудочная железа убойного скота;
пирогаллол;
плазма крови кроличья или человеческая;
пепсин;
пептон сухой ферментативный для бактериологических целей по ГОСТ 13805-76;
печень говяжья, телячья, кроличья, не содержащая ингибиторов, роста микроорганизмов;
рыба треска или пикша, судак, щука по ГОСТ 814-96;
сахароза по ГОСТ 5833-75;
сафранин: О или Т;
солод ячменный;
соль закиси железа и аммония двойная сернокислая - соль Мора по ГОСТ 4208-72;
спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67*;
____________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
спирт этиловый сырец по ГОСТ 131-67;
сок томатный по ГОСТ 937-91;
трипсин;
триптон;
триптический гидролизат казеина;
триптофан;
2, 3, 5-трифенилтетразолиум хлорид;
уголь активный по ГОСТ 4453-74;
фенолфталеин (индикатор);
фуксин (основной и кислый);
хлороформ по ГОСТ 20015-88;
цистеина гидрохлорид;
экстракт дрожжевой сухой;
экстракт мясной;
яйца куриные по ГОСТ 27583-88.
4. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ РЕАКТИВОВ, КРАСОК, ИНДИКАТОРОВ И КОМПОНЕНТОВ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
4.1. Агар голодный
дистиллированной воды, стерилизуют при температур (121±1) °С в течение 20 мин.
Применяют для наслаивания на посевы с целью предотвращения соприкосновения посевов с кислородом воздуха.
4.2. Взвесь (эмульсия) яично-желточная в физиологическом растворе.
физиологического раствора.
Добавляют к питательным средам для определения лецитиназной активности микроорганизмов.
Допускается яично-желточную эмульсию приготовлять следующим образом: свежие куриные яйца моют, ополаскивают холодной водой, опускают в раствор этилового спирта с объемной долей 70% и высушивают. Соблюдая правила асептики, разбивают каждое яйцо в стерильную чашку Петри и отделяют желток от белка. Помещают желток в стерильную колбу или флакон с четырьмя объемами стерильной воды и энергично перемешивают. Нагревают смесь на водяной бане при температуре (45±1) °С в течение 2 ч, оставляют на 18-24 ч при температуре от 0 до плюс 5 °С для формирования осадка.
Соблюдая правила асептики, собирают эмульсию над осадком. Эмульсию хранят при температуре от 0 до плюс 5 °С не более 72 ч.
4.3. Вода бромная
дистиллированной воды. Приготовляют бромную воду в вытяжном шкафу. Хранят в темной склянке с притертой пробкой в защищенном от света месте.
Применяют в качестве индикатора при определении содержания триптофана в питательных средах. При наличии триптофана в присутствии 3-4 капель бромной воды жидкость принимает розово-фиолетовую окраску.
4.2, 4.3. (Измененная редакция, Изм. N 1).
4.4. Вода пептонная
в колбы. Затем стерилизуют 20 мин при температуре (121±1) °С.
, водные растворы
и доводят объем до метки. Разливают приготовленный раствор глюкозы в стерильные пробирки и стерилизуют при температуре (112±1) °С в течение 15 мин или при температуре (100±1) °С в течение 3 сут по 30 мин, или фильтрованием через мембранный фильтр.
Применяют в качестве источника углеводов в питательных средах и восстанавливающего вещества в питательных средах для анаэробных микроорганизмов.
4.6. Индикатор Андреде
и стерилизуют при температуре (100±1) °С в течение 5 мин. Индикатор должен иметь соломенно-желтый цвет.
